Monoklonalt antistoff

Et monoklonalt antistoff er et antistoff produsert av en enkelt klon av B-lymfocytter. [ 1 ] Monoklonale antistoffer ( mAB ) er identiske antistoffer fordi de produseres av bare én type celle i immunsystemet , det vil si at alle kloner kommer fra samme morcelle. [ 2 ] Det er mulig å produsere monoklonale antistoffer som binder spesifikt til ethvert molekyl med antigen karakter. Dette fenomenet er av stor nytte i biokjemi , molekylærbiologi og medisin .

Monoklonal antistoffproduksjon

Hvis en fremmed substans ( antigen ) injiseres i et menneskes kropp, vil noen av B-cellene i immunsystemet deres endres til plasmaceller og begynne å produsere antistoffer som binder seg til det antigenet. Hver B-celle produserer bare én type antistoff; dermed vil forskjellige B-lymfocytter produsere strukturelt forskjellige antistoffer som vil binde seg til forskjellige deler av antigenet. Denne naturlige fysiologiske blandingen av antistoffer er kjent som "polyklonalt" antiserum . [ referanse nødvendig ]

For å produsere monoklonale antistoffer fjernes B-celler først fra milten til et dyr som har blitt eksponert for antigenet. Disse B-cellene smelter sammen i nærvær av PEG ( polyetylenglykol ) med multippelt myelomtumorceller ( en type kreft) som kan vokse på ubestemt tid i cellekultur . Denne fusjonen gjør cellemembraner mer permeable. Disse hybridsammensmeltede cellene, kalt hybridomer , kan formere seg raskt og i det uendelige (de er tross alt tumorceller) og kan produsere store mengder antistoffer. Hybridomene fortynnes og dyrkes nok ganger til å oppnå et annet antall visse kolonier, som produserer bare én type antistoff. Antistoffer fra ulike kolonier testes for deres evne til å binde seg til et gitt antigen, for eksempel med en type test som kalles ELISA , og for å bli selektert og isolert på den mest effektive måten.

Prosessen med produksjon av monoklonalt antistoff er kompleks. Først blir milten til den immuniserte musen desintegrert, hvor B-lymfocytter akkumuleres, som har dårlig levedyktighet i kultur, og smelter sammen med myelomceller som mangler enzymer involvert i syntesen av nytt DNA, slik som tymidinkinase (TK) eller hypoxanthine guanin phosphoribosyl transferase . (HGPRT). Cellefusjonsproduktene (hybridomer) dyrkes i HAT-medium (hypoxanthin, aminopterin og tymidin) hvor de myelomatiske cellene elimineres. Bare celler som er et produkt av en fusjon mellom en lymfocytt og en myelomcelle kan vokse i HAT-kulturmedium. Hybridcellene oppnådd etter fusjonsprosessen inneholder et høyt antall kromosomer (72 fra myelomet og 40 fra B-lymfocytten) som vil gå tapt i påfølgende celledelinger til de varierer mellom 70 og 80 kromosomer . Som en konsekvens av denne prosessen, mister noen celler evnen til å skille ut antistoffer eller grunnleggende funksjoner for cellelevedyktighet. Derfor, så snart en brønn er identifisert som positiv, gjennomgår den en kloningsprosess for å forhindre vekst av ikke-produserende celler som, som er metabolsk mer effektive, ville ende opp med å dominere kulturen.

Monoklonale antistoffer kan produseres i cellekultur eller i dyr. Når celler fra et hybridom injiseres i dyrket vev som bukhinnen (peritonealhulen), produserer det svulster som syntetiserer en antistoffrik væske, kalt ascitesvæske .

Teknologien som er nødvendig for produksjon av antistoffer i fravær av immunisering av dyret er kjent. Det er den såkalte rekombinante antistoffteknologien . Fremskritt innen genteknologi har i stor grad lettet genetisk manipulasjon, produksjon, identifisering og konjugering av rekombinante antistofffragmenter, og oppnådd nye multivalente og multispesifikke antistoffer.

Disse teknologiene har muliggjort utviklingen av screeningsstrategier for monoklonale antistoffer utenfor menneskekroppen. For dette er det først og fremst nødvendig å ha enorme biblioteker av antistoffgener, vanligvis ved PCR -amplifisering av cDNA fra lymfocytter , eller, alternativt, ved in vitro -syntese av gener ved bruk av randomiserte primere ( "randomisert slingring" ). 'Screening'-metoden til disse bibliotekene må ha en effektivitet som kan sammenlignes med immunsystemets, som kan oppnås ved å eksponere antistoffene som produseres på overflaten av mikroorganismer. Eksempler på mikroorganismene som brukes er filamentøse fager som M13 eller bakterier. Denne overflatepresentasjonen gjør det mulig å etablere en fysisk kobling mellom den antigenbindende funksjonen og antistoffgenet, slik at affiniteten for antigenet gjør at mikroorganismen som bærer antistoffgenet av interesse, kan isoleres fra millioner av andre. Når den spesifikke klonen er isolert, blir den amplifisert for produksjon av antistoffet av interesse, for eksempel i E. coli . [ 3 ]

Historie om forskning på monoklonale antistoffer

Niels K. Jerne , Georges Köhler og Cesar Milstein beskrev teknikken som muliggjorde dyrking av hybridomer eller hybridceller av B-lymfocytter med tumorplasmaceller av multippelt myelom. Med denne fusjonen av to celler, en programmert til å produsere et spesifikt antistoff, men som ikke formerer seg i det uendelige (lymfocytt) og en annen udødelig med stor vekstkapasitet, men som ikke produserer immunoglobulin (myelomcelle), kombineres nødvendig genetisk informasjon for syntesen av det ønskede antistoffet og en proteinsyntesekapasitet, som tillater dets ubestemte multiplikasjon både in vitro og in vivo . For dette bidraget mottok Jerne, Kölher og Milstein Nobelprisen i medisin i 1984. [ referanse nødvendig ]

I 2010 feiret monoklonale antistoffer 30 år siden utviklingen og sluttet å være en biologisk kuriositet for å bli en svært viktig form for behandling og diagnose ved ulike sykdommer. Det er mer enn 17 monoklonale antistoffer godkjent av FDA , men antallet monoklonale antistoffer i den kliniske utprøvingsfasen er høyt og representerer 30 prosent av forbindelsene som ble undersøkt i 2005. Svært viktig for behandling av ulike sykdommer som revmatoid artritt, ulike kreftformer, Crohns sykdom, blant annet. [ referanse nødvendig ]

Forskjellen mellom monoklonalt antistoff og polyklonalt antistoff

polyklonalt ab monoklonalt ab
epitoper de kjenner igjen Flere Unik
spesifisitet Det varierer mellom dyr og sangriaer. Høy, varierer ikke.
Affinitet Variabler, mellom innrykk. høy og uforanderlig
Opptreden Gjennomsnittlig konsentrasjon 1mg/ml

Varierende volum, avhengig av art.

Lav, i vevskultur.

Høy (opptil 20 mg/ml), i ascitesvæske.

relativ kostnad Bass Høy
Tilgjengelighet Uttømmelig Uuttømmelig
Produksjon Enkel, heterogen populasjon av antistoffer Kompleks, homogen populasjon av antistoffer.

Typer monoklonale antistoffer

I henhold til deres opprinnelse er det mulig å skille fire typer monoklonale antistoffer, som hovedsakelig kjennetegnes ved deres sammensetning og deres antigenisitet i organismen:

  • Antistoffer fra mus
  • Redusert terapeutisk effekt (immunsystemet identifiserer dem som fremmede og reagerer for å ødelegge dem).
  • De kan ha sekundære effekter, som nefrotoksisitet og allergiske reaksjoner .
  • Oppnådd fra mus gjennom humanisering av MAbs, ved genteknologi (de variable regionene kommer fra mus og gjenkjenner det spesifikke antigenet; de konstante områdene av antistoffene kommer fra mennesker).
  • De unngår avvisning av immunsystemet, ved å gå inn i kroppen.
  • De produserer antichimere antistoffer.
  • 90 prosent av antistoffet er av menneskelig opprinnelse, og reduserer dermed immunogenisiteten til antistoffene ytterligere.
  • De resterende 10 prosentene tilsvarer CDR eller hypervariable regioner, som er de eneste som kommer fra musen.
  • Hele antistoffet er av menneskelig opprinnelse.
  • Avvisningen av immunsystemet er praktisk talt ikke-eksisterende.

Per datoen for denne artikkelen eksisterer det få MoAbs av sistnevnte type.

Nomenklatur av monoklonale antistoffer

MoAbs er navngitt i henhold til de forskjellige konvensjonene som ble akseptert i henhold til internasjonale standarder (DCI), etablert av Verdens helseorganisasjon (WHO) og den offisielle amerikanske kirkesamfunnet (United States Adopted Names, USAN). [ referanse nødvendig ]

Navnene på alle monoklonale antistoffer inkluderer suffikset -mab , innledet av andre deler av ordet som har å gjøre med forskjellige faktorer som bestemmer det spesifikke målet for det monoklonale antistoffet, dets opprinnelse, typen medikament og et prefiks som bestemmer selskap produsent. [ referanse nødvendig ]

kommersielt prefiks Diana Opprinnelsen til mAb medikamenttype
Ifølge selskapet
interleukin

(k) (ki) (slekt) Eks. Anakinra (R-IL1)

Comp. menneskelig

(u) F.eks. Secukinumab

monoklonalt ab

(mab) Eks. Adalimumab

immunsystemets mål

(l) (li) (lim) Eks. Infliximab (TNFα)

menneskeliggjort

(zu) Eks. Natalizumab

reseptorantagonist

(ra) Eks. Anakinra

tumormål

(t) (tu) (tum) Eks. Rituximab (Lymph. B)

Chimerical

(xi) F.eks. Rituximab

fusjonsprotein

(cept) Eks. Abatacept

For eksempel RI-TU-XI-MAB , et kimært (-XI-) monoklonalt antistoff (-MAB) som virker mot et tumormål (-TU-), i dette tilfellet mot B-CD20-lymfocytter, i lymfomene. [ referanse nødvendig ]

Virkningsmekanisme

Monoklonale antistoffer (AbMo) utøver sine aktiviteter på en svært variert måte, avhengig av målene som er berørt. I sin virkning er de forskjellige typene eksisterende antistoffer, forklart ovenfor, også avgjørende viktig.

Avhengig av deres ytelse eller virkningsmekanisme, kan de klassifiseres som følger:

Alle disse kan også utføre en rekke handlinger. For eksempel:

Generering av monoklonale antistoffer

Teknikken som ble brukt til å generere monoklonale antistoffer ble utviklet av C. Milstein og G. Kohler i 1975 og som de vant Nobelprisen for medisin og fysiologi.

Produksjonsteknologier

Produksjonen av monoklonale antistoffer fokuserer på syntesen av en stabil cellelinje som skiller ut en bestemt type immunoglobulinisotype som virker mot et spesifikt antigen. [ referanse nødvendig ]

Hybridomsyntese

For å oppnå monoklonale antistoffer mot et antigen, må hybridomer syntetiseres , en cellelinje som er et resultat av fusjon av antistoffproduserende B-celler fra et dyr, som har blitt immunisert med antigenet av interesse, og en ikke-utskillende myelomatøs tumorcelle av antistoffer, som mangler enzymet hypoxantin - guanin - fosforibosyltransferase , som øker permeabiliteten til membranen og følgelig får den til å reprodusere seg raskere. [ referanse nødvendig ]

B-celler, i en in vitro-kultur, dør i løpet av få dager. Av denne grunn brukes myelomatøse celler , med sikte på å udødeliggjøre dem.

                         Hybridoma egenskaper
De overlever på ubestemt tid i kulturmedier.
De produserer monoklonale antistoffer mot det spesifikke antigenet.
Det er spesifikt for et enkelt antigen.
Den kan brukes til å identifisere ukjente antigener i en prøve.

Prosessen med hybridomdannelse hos mus er forklart i detalj i følgende skjema:

  1. Muse-immunisering.
  2. Innhenting av immuniserte B-celler fra milten.
  3. Bruk av myelomceller, som gir ubegrenset delingskapasitet.
  4. Hybridisering av B-celler med myelom.
  5. Seleksjon og modning av hybridomer.
  6. klonal forplantning.
  7. Oppnå monoklonale antistoffer.

Produksjon av kimære og humaniserte monoklonale antistoffer

Siden introduksjonen av de første monoklonale antistoffene oppnådd ved hybridomteknikken, har det blitt observert at sterke avvisningsresponser produseres fordi de er av animalsk opprinnelse (mus), spesielt i terapier som krever langvarig behandling, siden immunsystemet identifiserer dem som mennesker fremmede og reagerer for å ødelegge dem, så dens terapeutiske effekt er klart redusert. For å overvinne dette problemet ble bruk av rekombinante DNA-teknikker og molekylærbiologi igangsatt.

De kan også presentere mulige bivirkninger som nefrotoksisitet, anafylaktiske reaksjoner , etc. Derfor er det endelige målet å oppnå antistoffer som har den maksimale andelen av menneskelig opprinnelse, og minimerer enhver type reaksjon som kan genereres. Som konklusjon, skaff humane monoklonale antistoffer.

Ulike teknikker er utviklet for å tilby løsninger på den første umuligheten av å oppnå fullstendig humane monoklonale antistoffer, blant annet transformasjon av humane B-lymfocytter i kultur ved bruk av Epstein-Barr-viruset , bruk av mus med alvorlig kombinert immunsvikt, bruk av transgene mus, eller rekombinante DNA-teknikker . Alle disse teknikkene har gitt forskjellige ulemper som har gjort det umulig å endelig utvikle humane monoklonale antistoffer.

Derfor, i genereringen av MoAbs for klinisk bruk hos mennesker, er en grunnleggende prosess å humanisere antistoffene, som vil fokusere på å opprettholde bindingsspesifisiteten til disse antistoffene, men redusere deres immunogenisitet. Denne humaniseringsprosessen består av to faser: å oppnå kimære og humaniserte antistoffer.

  1. Innhenting av kimære antistoffer: gjennom rekombinante DNA-teknologier, som fokuserer på å kombinere gener som koder for den konstante regionen til humane Ig ved hjelp av vektorer med gener som koder for den variable regionen til mus. Det er mulig å oppnå antistoffer med en human del som tilsvarer den konstante delen (Fc), og den variable delen er animalsk.
  2. Å oppnå humaniserte antistoffer: gjennom proteinteknikk . Teknikken er basert på overføring av CDR (komplementaritetsbestemmende region) til muse-immunoglobulinene til de variable områdene som er både i tungkjeden og av den lette kjeden av humane immunglobuliner. Til slutt oppnås humane antistoffer som kun har de hypervariable regionene (" CDR " ) fra musen.

Monoklonale antistoffforbedringsteknologier

Monoklonale antistoffer, når de kombineres med andre molekyler, øker deres effektivitet i deres bruk for terapi. Disse molekylene (peptider og terapeutiske proteiner) gir problemer når de introduseres i kroppen, på grunn av deres toksisitet og nedbrytning. Dens forening med monoklonale Abs optimerer effekten.

Denne forbedringen av antistoffer skjer primært på to nivåer:

  • Forbedring av effektorfunksjoner: hovedsakelig gjennom immuntoksiner , konjugert med enzymer, bispesifikke antistoffer og immuncytokiner.
  • Affinitetsforbedring: ved hjelp av [glykoengineering]] og syntetiske biblioteker.
  • Forbedring av terapeutisk effekt

Anvendelser av monoklonale antistoffer

Når det først er produsert monoklonale antistoffer som binder seg til visse stoffer, kan disse brukes til å påvise tilstedeværelsen og mengden av dette stoffet, takket være Western blot -testen , som påviser et stoff i en løsning, eller med en immunfluorescenstest . , som påviser et stoff i en hel celle. Monoklonale antistoffer brukes også til å rense et stoff med teknikker som kalles immunutfelling og kromatografi .

Monoklonale antistoffer viser en rekke fordeler i forhold til polyklonale antistoffer; for eksempel:

  • større homogenitet;
  • reproduserbarhet av dens effekter, som en konsekvens av dens homogenitet;
  • større potensiell kapasitet til å velge de beste antistoffene i affinitet, type gjenkjennelse.

Monoklonale antistoffer brukes på mange felt; for eksempel:

  • Biomedisinsk forskning , som genidentifikasjon og kloning, proteinidentifikasjon og isolering , enzymaktivering , kunnskap om molekylær struktur og morfogenese.
  • Diagnose: I medisin, takket være den store spesifisiteten og praktisk talt ubegrensede kapasiteten til monoklonale antistoffer til å gjenkjenne enhver kjemisk struktur, tillater den påvisning av hormoner , vitaminer , cytokiner ; medikamentovervåking, påvisning av infeksjonssykdommer i mikrobiologi ; påvisning av allergener i allergi, hematologi, tumormarkører og hjerteinfarkt , rettsmedisinske applikasjoner, immunoscintografi. Ulike molekylærbiologiske verktøy som ELISA , EIA, cytometri , immunhistokjemi , immunfluorescens brukes i diagnostiske teknikker . Monoklonale antistoffer er et av de mest brukte stoffene i diagnostiske laboratorier.
  • Katalyse : Monoklonale antistoffer har blitt brukt som katalysatorer for flere kjemiske reaksjoner .
  • Biosensorer : Monoklonale antistoffer koblet til elektroniske transdusere kan oppdage både organiske og uorganiske molekyler som tungmetallforurensning i mat og vann, påvisning av giftige gasser, etc. En biosensor er et analytisk instrument som består av et immobilisert biologisk materiale som et enzym, antistoff, helcelle, organell eller kombinasjoner derav, i intim kontakt med et passende transdusersystem som konverterer det biokjemiske signalet til et kvantifiserbart elektrisk signal.
  • Behandling: Terapeutiske anvendelser utgjør det viktigste feltet for monoklonale antistoffer, siden de er i stand til å ødelegge celler, inkludert tumorceller, gjennom forskjellige mekanismer. De brukes i behandlingen av ulike autoimmune sykdommer som revmatoid artritt, kreft eller for å forhindre avstøtning etter en transplantasjon . Det finnes flere monoklonale antistoffer godkjent for bruk ved visse sykdommer. [ 3 ]
  • Målrettet kreftbehandling: Målrettet kreftbehandling er legemidler eller andre stoffer som blokkerer vekst og spredning av kreft ved å forstyrre spesifikke molekyler ("molekylære mål") som er involvert i vekst, progresjon og spredning av kreft. Målrettede kreftbehandlinger kalles noen ganger "molekylært målrettede legemidler", "molekylært målrettede terapier", "presisjonsmedisin" eller lignende termer.

Eksempler:

Rituximab (Rituxan) CD20 CD20-proteinet som finnes i B-lymfocytter er av stor betydning for utviklingen av sykdommen, da det er en tumormarkør.I dette tilfellet angripes det av antistoffet, noe som klart reduserer aktiviteten.
Alemtuzumab (Campath) CD52 CD52-proteinet (også "cluster of differentiation") finnes på B- og T-lymfocytter, monocytter og blodplater, men ikke på hematopoietiske celler; derfor dens store betydning og interesse.

Monoklonale antistoffer godkjent for terapeutisk bruk

Det er flere og flere monoklonale antistoffer som har terapeutisk nytte ved mange sykdommer som kreft, organtransplantasjonsavstøtning, autoimmune sykdommer, allergier og reverserer effekten av dabigatran, et antikoagulant, slik tilfellet er med idarucizumab. [ 4 ]

monoklonalt antistoff Antigen Virkningsmekanismen Indikasjoner
Abciximab Gpllb/llla glykoprotein Hemmer blodplateaggregering . Antitrombotisk ved koronare og angioplastiske intervensjoner
Adalimumab TNF -alfa Hemmer den proinflammatoriske effekten av TNF-alfa. Crohns sykdom , revmatoid artritt , ankylopoietisk spondylitt , psoriasis .
alemtuzumab CD52 Antistoffavhengig cellemediert cytotoksisitet (ADCC), CDC. Kronisk B-lymfoid leukemi
Basiliximab CD25 Det hemmer aktiveringen av T-lymfocytter mediert av CD25. Forebygging av akutt avstøtning ved nyretransplantasjon
Bevacizumab VEGF -A Hemmer den proangiogene effekten av VEGF-A. Tykktarmskreft
Cetuximab EGFR Blokkerer EGF - binding til sin reseptor på tumorceller og deres spredning ADCC, CDC. Tykktarmskreft
Clenoliximab CD4 Leddgikt
Crenezumab Det virker ved å nøytralisere β-amyloidproteinet . Det brukes eksperimentelt for behandling av Alzheimers sykdom.
Daclizumab CD25 Det hemmer aktiveringen av T-lymfocytter , mediert av CD25. Forebygging av akutt avstøtning ved nyretransplantasjon
Denosumab RANKL Osteoklasthemming _ Osteoporose hos postmenopausale kvinner med høy risiko for brudd
Dupilumab IL4 og IL13 reseptorer Blokkerer den inflammatoriske responsen, mediert av interleukin 4 og 13. Atopisk dermatitt
Eculizumab Det blokkerer komplementsystemet, og binder seg til C5.

Paroksysmal nattlig hemoglobinuri , hemolytisk uremisk syndrom , myasthenia gravis .

Edrecolomab EpCAM, ADCC, CDC Hemmer vekstfaktorreseptorer . Tykktarmskreft
Efalizumab CD11a Det hemmer adhesjonen av T-lymfocytter til endotelet og deres aktivering. Psoriasis , trukket tilbake fra markedet
emicizumab Den aktiverer den manglende faktor IX, nødvendig for effektiv hemostase . hemofili A
Pirferidon [ 5 ] CTGB Hemmer bindevevsvekstfaktornivåer Lungefibrose
Gemtuzumab CD33 Cytotoksisk effekt på grunn av DNA- skade og apoptose AML
Ibritumomab CD20 Strålebehandling , ADCC, CDC, apoptose Non-Hodgkin lymfom
Idarucizumab Dabigatran Det reverserer antikoagulasjonen produsert av dabigatran på minutter. slutter å blø
Infliximab TNF -alfa Hemmer den proinflammatoriske effekten av TNF-alfa. Crohns sykdom , Revmatoid artritt , Ankylopoietisk spondylitt , Psoriasis
Ipilimumab CTLA4 Det hemmer kontrollen av T-celleaktivitet. metastatisk melanom
Muromonab CD 3 immundempende middel; anergi og apoptose av T-lymfocytter, etter deres aktivering. Behandling av akutt transplantasjonsavvisning
Ofatumumab CD20 produserer apoptose. Kronisk lymfatisk leukemi , follikulær non-Hodgkins lymfom , revmatoid artritt og multippel sklerose .
Omalizumab IgE Reduserer IgE-nivåer i sirkulasjonen, blokkerer binding til reseptorene. allergisk astma
Palivizumab RSV F-protein passiv immunterapi Profylakse av respiratorisk syncytial virussykdom hos barn
Ranibizumab VEGF Hemmer den proangiogene effekten av VEGF. Eksudativ -type aldersrelatert makuladegenerasjon
Rituximab CD20, ADCC, CDC Gir apoptose . Non -Hodgkins lymfom , kronisk lymfatisk leukemi
Tositumomab CD20 Strålebehandling, ADCC, CDC, lysosomavhengig drap og homotypisk, ikke-apoptotisk, ikke-autofagisk adhesjon Non-Hodgkin lymfom
Trastuzumab ErbB2 /nev Det hemmer spredningen av tumorceller mediert av ErbB2 og ADCC. metastatisk brystkreft
ublituximab CD20 produserer apoptose. Non -Hodgkins lymfom , kronisk lymfatisk leukemi

De siste årene har det vært mange flere FDA-godkjente monoklonale antistoffer. [ 6 ]

Referanser

  1. ↑ Lipman, N.S.; Jackson, L.R.; Trudel, LJ; Weis-Garcia, F. (1. januar 2005). "Monoklonale versus polyklonale antistoffer: kjennetegn, applikasjoner og informasjonsressurser" . ILAR Journal (på engelsk) 46 (3): 258-268. ISSN  1084-2020 . doi : 10.1093/ilar.46.3.258 . Hentet 14. juni 2018 . 
  2. ↑ Monoklonale versus polyklonale antistoffer: kjennetegn, applikasjoner og informasjonsressurser . ILARJournal. 1. januar . Hentet 14. juni 2018 . 
  3. ↑ a b Terapeutiske monoklonale antistoffer. Technology Watch Report . Genome Spain, General Foundation for det autonome universitetet i Madrid . Hentet 13. juni 2012.
  4. ↑ Pollack, Charles V.; Reilly, Paul A.; Eikelboom, John; Glund, Stephan; Verhamme, Peter; Bernstein, Richard A.; Dubel, Robert; Huisman, Menno V. et al. (6. august 2015). "Idarucizumab for reversering av Dabigatran" . The New England Journal of Medicine 373 (6): 511-520. ISSN  1533-4406 . PMID  26095746 . doi : 10.1056/NEJMoa1502000 . Hentet 4. februar 2016 . 
  5. ↑ Rondon, Carlos (3. august 2012). "FG-3019 monoklonalt antistoff for lungefibrose mottar orphan drug-godkjenning av FDA" . Hentet 3. august 2012 . 
  6. ^ "Monoklonale antistoffer godkjent av EMA og FDA for terapeutisk bruk - ACTIP" . www.actip.org (på britisk engelsk) . Arkivert fra originalen 20. desember 2020 . Hentet 14. januar 2018 . 

Bibliografi

Eksterne lenker